影響抗原抗體反應的因素有兩方面，一是反應物自身的因素；二是反應環境條件。
（一）反應物自身的因素
1.抗體：不同來源的抗體，反應性各有差異，抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應，為提高試驗的可靠性，應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑。等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成，單克隆抗體不適用于沉淀反應。
2.抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數目均可影響反應結果。顆粒性抗原出現凝集反應，可溶性抗原出現沉淀反應，單價抗原與相應抗體結合不出現沉淀現象。
（二）反應環境條件
1.電解質：抗原與抗體發生特異性結合后，雖由親水膠體變為疏水膠體，若溶液中無電解質參加，仍不出現可見反應。為了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。
2.酸堿度：抗原抗體反應必須在合適的pH環境中進行。蛋白質具有兩性電離性質，因此每種蛋白質都有固定的等電點。抗原抗體反應一般在pH6～9進行，有補體參與的反應pH為7.2～7.4，pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應。
3.溫度：在一定范圍內，溫度升高可加速分子運動，抗原與抗體碰撞機會增多，使反應加速。一般為15℃～40℃，常用的抗原抗體反應溫度為37℃，溫度如高于56℃，可導致已結合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞。每種試驗都有其*的zui適反應溫度要求。此外，適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸，加速反應。
