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什么事表面抗金標法--HBsAg?
更新時間:2010-09-13   點擊次數:2682次

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和表面抗體(抗—HBs)HBsAg存在于病毒顆粒的外殼以及小球形顆粒和管狀顆粒。于感染后2-12周,丙氨酸轉氨酶(ALT)升高前,即可由血內測到,一般持續4~12周,至恢復期消失,但感染持續者可長期存在。HBsAg無感染性而有抗原性,能刺激機體產生抗- HBs。在HBsAg自血中消失后不久或數星期或數月,可自血中測到抗—HBs,抗HBs出現后其滴度逐漸上升,并可持續存在多年。抗-HBs對同型感染具有保護作用。近期感染者所產生的抗-HBs屬IgM,而長期存在血中的為抗-HBsIgG。HBsAg有“a”、“b”、“y”、“r”、“w”等多種抗原決定簇,其中“a”是共同的抗原決定簇,“d”、“y”和“r”、“w”為主要的亞型決定簇。

  HBsAg有8種亞型和2種混合亞型,以adr,adw,ayr,及ayw為主的4種亞型。各亞型的地理分布不同,adr亞型主要分布在亞洲及太平洋地區,adw亞型主要見于北歐,美洲及澳洲,ayw亞型主要在非洲,中東和印度,ayr亞型罕見。在我國的主要是adr亞型,但廣西的東北部則主要為adw亞型,西藏,新疆及內蒙則有ayw亞型為主。亞型的測定對流行病學調查,預防研究有一定意義。

金標紙條采用雙抗原夾心法免疫測定原理,選擇經純化的基因工程制備的gp36、gp41、p24抗原作為包被抗原和gp41、gp36基因工程抗原和 p24合成肽作為膠體金結合抗原。當待檢標本中含有HIV抗體時,先和金標記抗原結合,由于層析作用反應復合物沿硝酸纖維膜向前移動,當遇到包被抗原時,形成Ag-Ab-Ag-Au復合物而富集在包被線上,形成紅色沉淀線。同時在包被膜上還有一條質控線對照,故當有兩條紅線時判為陽性,只有一條紅線時,判為陰性。
   elisa也是采用雙抗原夾心法免疫測定原理,抗原包被于固相表面上,血清中如存在抗體則特異與之結合,再經過酶(抗抗體)、顯色劑等級連放大作用(每步之間要洗的!)根據co值判斷結果。
   從試驗原理基本是一致的,具體方式金標識以層析推進反應的進程,elisa是直接加入反應再清洗。如果每個步驟均得到嚴格控制的話,elisa更可靠一點,如果有凝血或洗板不干凈,恐怕還不如金標。
   一般elisa,如陽金標在作一下。金標亦陽,elisa第二遍就省了,直接送確診試驗室。如金標陰,或是elisa弱陽(od<2*co)elisa再復查。


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