談一下怎樣靈敏使用ELISA這個檢查辦法以及怎樣去選擇ELISA試劑盒。ELISA這個辦法的原理,我們都很明白。
可真實用起來的時分,有時分就有點犯模糊,我談一下自個的了解。
1、有些客戶會用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,后來會檢查粘膜特異性的sIgA以及血清里邊IgG,IgE等目標。當客戶向我咨詢采購這幾個目標的盒子的時分,我很肯定地說這些目標的檢查要你自個特制,不會有商品化的盒子出售的。
2、ELISA試劑盒對于一些小分子的檢查,比方前列腺素、糖皮質激素的檢查,我的了解是要用競爭法ELISA去檢查,也要采購采用這個辦法的盒子。通常細胞因子的檢查,都是采用常規的夾心法ELISA檢查,由于因子分子量比較大,通常10幾個KD擺布,很簡單找到兩個或許多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不一樣的表位,也就決定了包被抗體和檢查抗體無法一起小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗,每個孔參加一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶符號的檢查抗體,顯色底物。樣品的意圖小分子的含量越高,吸光度越低。
3、對于胰島素的檢查,我仍是引薦millpore 旗下LInco公司的檢查試劑盒,不管是放免仍是ELISA,聽說權在他們手中。
4、做試驗面向的ELISA試劑盒種屬主要是人,大鼠和小鼠,如今市面上雞、牛、馬、羊、兔各種目標的盒子都有售,真不知道這些抗體是怎樣來的,。據我所了解,這些炎癥目標仍是有很大種屬特異性的。
5、很多客戶有個誤區,ELISA試劑盒拿來一個目標就想當然地嘗試用ELISA去檢查,其實應當多動腦,該檢查活性的檢查活性。