ELISA實驗過程中操作步驟繁多復雜,其中洗滌雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。這一步驟不容小視哦,上海通蔚在此分享洗滌的方法。
ELSIA 就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔內反應液;
b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2 分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
d.吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
e.重復操作c 和d,洗滌3-4次(或按說明規定)。
(2)流水沖洗式
流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續沖洗 2 分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2 分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。
已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
上海通蔚1月主推ELISA試劑盒,全場七折*,詳情請點擊“在線客服"咨詢或!