我們知道,可以用作ELISA測定的標本很廣泛,包括了體液、分泌物和排泄物等,均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。這些標本搜集的時間、方法和保存都有必定的要求。今天上海通蔚生物為您
說明:ELISA操作嚴格要求定當做出好實驗。
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗刷的,應為新鮮的和高質量的。ELISA試劑盒自配的緩沖液使用pH計測量較正。從冰箱中取出的實驗用試劑應待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
試劑盒的制造:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,留心每批的細節。在運用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地回收其間的細胞因子。依據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。一般待測抗原標準曲線的線性規模的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、擴展試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物體系可在必定規模內提高靈敏度。為了優化靈敏度,主張孵育標準品和標本。ELISA試劑盒若運用過氧化物酶作為顯色體系,應制止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
試劑盒的操作因固相載體的構成不同而有所差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。
洗板方法:
① 手工洗板,吸去(不行觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上襯托幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾回;將推薦的洗刷緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,依據需要,重復此進程數次。
② 自動洗板,如果有自動洗板機,應在嫻熟運用后再用到正式實驗進程中。